เปรียบเทียบความเข้มข้นของปริมาณดีเอ็นเอที่สกัดจากเลือดโคในการตรวจแยกเพศ ด้วยวิธี PCR โดยใช้ TSPY GENE

เปรียบเทียบความเข้มข้นของปริมาณดีเอ็นเอที่สกัดจากเลือดโค ในการตรวจแยกเพศด้วยวิธี PCR โดยใช้ TSPY Gene วิบูรณ์ ตุลารักษา1* สายใจ ชื่นสุข1 บทคัดย่อ Testis-specific protein, Y-encode (TSPY) เป็นยีนที่อยู่บนโครโมโซม Y และมีความจำเพาะต่อการศึกษาการคัดเลือกเพศในโคเพศผู้ โดยการศึกษาครั้งนี้เป็นการเปรียบเทียบปริมาณดีเอ็นเอที่ใช้ในการตรวจแยกเพศโดยยีน TSPY ด้วยเทคนิค Polymerase Chain Reaction (PCR) โดยใช้ดีเอ็นเอที่สกัดจากเลือดโคสายเลือดโฮลสไตน์ฟรีเชียน 100 ตัวอย่าง แบ่งเป็นเพศผู้และเพศเมียอย่างละ 50 ตัวอย่าง และใช้ primers ที่มีความจำเพาะต่อยีน TSPY ด้วยเทคนิค PCR พบว่าประสิทธิภาพการตรวจให้ผลแม่นยำถึง 100% โดยให้ผลบวกที่มีขนาดผลผลิตจากปฏิกิริยา PCR ขนาด 260 bp เฉพาะตัวอย่างจากโคเพศผู้เท่านั้น และไม่พบผลบวกในเพศเมียเลย นอกจากนี้ยังสามารถตรวจพบผลผลิต PCR จากการทดลองเปรียบเทียบปริมาณความเข้มข้น DNA template 10 ng 1 ng 0.1 ng 0.01 ng และ0.001 ng (1 pg) ตามลำดับ พบว่าสามารถตรวจสอบได้ที่ระดับความเข้มข้นของ DNA template เพียง 0.001 ng (1pg) จากการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่า TSPY เป็นยีนที่มีความจำเพาะต่อโคสายเลือดโฮลสไตน์ฟรีเชียนเพศผู้ คำสำคัญ: โคสายเลือดโฮลสไตน์ฟรีเชียน การตรวจแยกเพศ polymerase chain reaction ยีน TSPY ทะเบียนวิจัยเลขที่ : 51(1)-0208-045 1กลุ่มวิจัยและพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพการผลิตปศุสัตว์ สำนักเทคโนโลยีชีวภาพการผลิตปศุสัตว์ ถนนติวานนท์ ตำบลบางกะดี อำเภอเมือง จังหวัดปทุมธานี 12000 * ผู้เขียนผู้รับผิดชอบ:[email protected]

Comparison on DNA Concentration Extracted from Bovine Blood Samples in Sexing Determination by Polymerase Chain Reaction and Using the TSPY Gene Wiboon Tularaksa1*, Saijai Cheunsuk1 Abstract Testis-specific protein, Y encoded (TSPY) is gene cluster on Y chromosome and specific to study sex determination for male cattle dairy. This study was performed in order to compare DNA concentration for sex determination with TSPY gene using Polymerase Chain Reaction (PCR) technique. DNA from blood samples of 100 Thai Holstein dairy (50 male and 50 female), were tested with specific primer for TSPY gene using PCR technique. The study showed that sexing efficiency was 100% with all male samples were positive and all female were negative. DNA template concentrations are diluted 10, 1, 0.1, 0.01, and 0.001 ng, respectively. The result presented, only small amount of DNA template (1 pg) was used in each test. This result indicated that TSPY was male-specific marker for Thai Holstein dairy cattle. Keywords: Holstein Friesian Cattle, sex determination, polymerase chain reaction, TSPY gene 1Livestock Biotechnology Research and Development Section, Bureau of Biotechnology in Livestock Production, Tiwanon Road, T. Bangkadee, A. Muang, Pathumthani Province, 12000, THAILAND * Corresponding author: [email protected]